1. 产品简介：

外泌体是一种含有RNA和蛋白质的小囊泡（30-120 nm），这些RNA和蛋白质由各种培养中的细胞分泌，在体液（包括血液、唾液、尿液和母乳）中大量存在。

外泌体被认为是细胞间信使，可在特定细胞之间传递效应物或信号大分子。然而，外泌体的结构、传递物组分以及所涉及的生物途径仍不完全清楚。外泌体功能与转运的生物学研究需要分离完整的外泌体，但目前外泌体分离困难，且方法繁琐、无特异性。

细胞上清外泌体抽提试剂盒提供了一种从细胞上清样本中浓缩完整外泌体的简单、可靠方法。通过束缚水分子，细胞上清外泌体抽提试剂盒使不易溶解组分（即外泌体）从溶液中析出，可实现低速离心的方法收集。

2. 外泌体保存条件：

     4 ^oC保存，一周有效；-20 ^oC保存，长期有效。

3. 注意事项：

（1）为了确保分离的外泌体来自目的细胞，用不含外泌体的胎牛血清（FBS）培养细胞（一般使用的胎牛血清含有极高含量的外泌体，会污染来源于目的细胞的外泌体）。若无法使用不含外泌体的胎牛血清培养细胞，在分离外泌体前，目的细胞系应在无胎牛血清条件下培养12小时；

（2）如果要从血清中分离完整的外泌体，请使用血清外泌体抽提试剂盒；

（3）分离完整外泌体后，可使用外泌体RNA和蛋白质分离试剂盒纯化RNA和蛋白质；

（4）本产品仅限于专业人员的科学研究使用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

使用方法：

样本制备

（1）收取细胞培养基；

（2）以12000g离心细胞培养基10分钟，去除细胞和碎片；

（3）将离心后的细胞培养基上清液转移到新管中。

外泌体分离

（1）将所需体积的无细胞培养基转移到新管中，添加0.5体积的细胞上清外泌体抽提试剂；

（2）通过旋转或上下移管充分混合无细胞培养基-试剂混合物，直到形成均质溶液；

注意：溶液应呈浑浊状。

（3）将样品在2-8 ^oC下静置过夜；

（4）静置后，将样品在4 ^oC以10000 g离心1小时；

（5）离心后，弃去上清液，外泌体即包含在管底部的颗粒中；

（6）使用移液管尖端将颗粒完全重悬于1×PBS或类似缓冲液中。

（7）收获外泌体颗粒：将含有重悬液的1.5ml离心管于4^oC以12000g离心2min保留上清液，该上清液中富含外泌体颗粒（若沉淀较多，可12000g/2min离心多次，至无明显沉淀，每次取离心上清液。）颗粒被再悬浮后，外泌体可进行下游分析或通过亲和方法进一步纯化。

6. 保存条件

本品在室温可稳定保存24个月，使用前请充分混匀。