细胞冻存液说明书-100ml.doc

产品简介：

（1）是一种即用型无血清细胞冻存液，通用于各类动物细胞株（肿瘤细胞和常规细胞）。

（2）本产品为即用型无菌冻存液，操作简单便捷。

（3）本产品冻存细胞可在-80℃长期保存（> 3年）。

（4）不含动物来源性蛋白，不含血清，可减少各类细菌、病毒和支原体等污染，保证冻存细胞的安全。

（5）配方成分明确，冻存液含10% DMSO，同时具有葡萄糖等各类细胞营养成分。

（6）本产品可提高复苏细胞存活率和活力，同时适合于无血清培养细胞和蛋白表达细胞。

保存条件：

4 ℃保存，6个月有效。-20 ℃保存，1年有效。

注意事项：

（1）Cellive在冻存细胞分装后，应尽快移入到-80 ℃超低温冰箱，或温度由高至低梯度保存转移。

（2）对于干细胞冻存时，我们建议用户在使用前，事先对所冻存的细胞进行至少为期1周的该产品试验性细胞冷冻保存培养，确认性能后再进行正式冻存。

（3）Cellive含有10% DMSO，部分对DMSO敏感的细胞，建议对其进行至少1周的本产品试验性的细胞冻存培养，确认性能后再正式冻存。

（4）请确保冻存前细胞生长情况良好，例如处于对数生长期的细胞，并且冻存时存活率大于90%。

（5）建议细胞冻存在液氮中，可以长时间进行保存。

（6）请使用耐受有机溶剂的马克笔进行标记，以防做的标记被酒精或异丙醇等有机溶剂擦掉，而不能辨识。

（7）本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于医药食品等方面。

细胞冻存步骤

1. 根据常规实验方法对生长良好的贴壁细胞进行消化收集，将处于对数期的贴壁细胞或悬浮细胞收集于离心管中。

2. 根据培养细胞的密度确定所需冻存细胞数。

3. 上述收集的细胞悬液，100-300 g，5-10分钟离心收集细胞沉淀，弃上清。

4. 加入适量的Cellive细胞冻存液于离心管中，轻柔吹打直至细胞完全混匀，细胞浓度约为1*10⁶-1*10⁷ cells/mL。

5. 将细胞混合液分装于冻存管中，建议每管1 mL。

6. 分装好的细胞冻存管，可于-80  ℃长期冷冻保存。

7. 液氮中长期保存，需先放入-80  ℃冰箱至少一天时间，方可移至液氮罐中保存。

冻存细胞复苏步骤

1. Cellive冻存液细胞复苏遵从慢冻快融原则。

2. 取出冻存的细胞，立即放入37  ℃水浴中快速解冻。

3. 待冻存管中细胞混合液即将完全融化，且残余极少量冰晶后，立即加入1 mL 预热至37  ℃的细胞培养基于冻存管中，轻柔混匀后转移至含有约5 mL该细胞培养基的离心管中，100-300 g，5-10分钟离心收集细胞沉淀，弃上清。

4. 加入适量的新鲜细胞培养基，使用移液管缓缓加入到细胞沉淀，轻柔地混匀，将细胞混合液移至无菌培养容器中。

5. 镜检细胞后，可根据各自研究自行调整细胞密度与培养方式。